本报讯（记者孙丹宁）近日，中国科学院大连化学物理研究所研究员张丽华、袁辉明团队在单细胞分泌组分析新方法研究中取得新进展。他们通过结合非天然氨基酸代谢标记、基于点击化学的选择性富集等技术，实现了单细胞分泌组的全景式分析，为在单细胞水平深入研究细胞分泌异质性提供了重要技术支撑。相关成果发表于《德国应用化学》。
由于单细胞分泌组含量极低，并且在生理培养条件下易受血清高丰度蛋白的干扰，目前，单细胞分泌组分析主要依赖抗体法，分泌蛋白的鉴定数量不超过42种，单细胞分泌组的非靶向大规模分析仍面临挑战。
针对这一难题，研究团队采用L-叠氮基高丙氨酸（AHA）对细胞新生成的蛋白质进行代谢标记，通过微流控芯片对AHA标记的单细胞进行分离和原位培养，并研制出炔基功能化毛细管微反应器，用于实现基于点击化学的分泌组选择性富集。蛋白质的共价结合允许进行严格的清洗，以去除非特异性吸附的干扰蛋白。
研究发现，该方法在复杂干扰背景下对低丰度蛋白质具有高效的富集能力。团队进一步将该方法用于单个HeLa细胞分泌组分析，平均定量出389种蛋白质，与基于抗体的分泌蛋白靶向分析方法相比，鉴定数目实现了显著提升。
相关论文信息：
https://doi.org/10.1002/anie.202417351
化学
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